Đặc điểm: 

Ưu điểm của hệ thống Sapphire :

• Kết hợp bốn phương thức chụp ảnh trong  một hệ thống duy nhất

• Quét bốn màu đồng thời

• Chụp ảnh có độ phân giải cao - xuống tới 10 micron

• Độ nhạy cao cho các giới hạn phát hiện thấp hơn nhiều (femtogram)

• Dải động siêu rộng giúp định lượng chính xác

• Các mẫu có hàm lượng thấp và cao được định lượng đồng thời

• Dễ sử dụng

• Phần mềm chụp và phân tích hình ảnh mạnh mẽ

• Kích thước nhỏ gọn - 75 x 70 x 45 cm

 Đặc điểm của hệ thống:

• Huỳnh quang cận hồng ngoại, huỳnh quang RGB, phát quang hóa học (Chemiluminescence), khả kiến, ánh sáng trắng và hình ảnh phốt pho

• Lên đến bốn laser trạng thái rắn làm nguồn kích thích (450, 520, 660 & 780 nm)

• Ống nhân photon (PMT) để chụp ảnh huỳnh quang và phốt pho

• Điốt quang Avalenche (APD) để chụp ảnh cận hồng ngoại

• Cảm biến CCD cho hình ảnh hóa phát quang và hình ảnh khả kiến

• Phần mềm Sapphire Capture để chụp ảnh chất lượng cao nhưng thao tác vô cùng đơn giản

• Phần mềm AzureSpot Analysis để định lượng chính xác

Các model của Sapphire:

Các ứng dụng nổi bật của hệ thống: 

A.Ứng dụng hình ảnh huỳnh quang:

Nâng cao hình ảnh huỳnh quang của bạn với các tín hiệu huỳnh quang ổn định, giúp đạt được khả năng định lượng đáng tin cậy từ các dải rất yếu đến rất mạnh. Hệ thống có thể phân tích các mẫu có hàm lượng từ thấp đến cao.

Sapphire cho phép người sử dụng bắt tín hiệu cho nhiều loại protein, cung cấp nhiều kết quả hơn từ mỗi mẫu. Ngoài ra hệ thống có thể hỗ trợ một dải rộng các loại thuốc nhuộm từ ánh sáng khả kiến và cận hồng ngoại (NIR) với độ nhạy cao.

Các ứng dụng cụ thể chụp huỳnh quang:

1.Định lượng đồng thời đa tác nhân trong phản ứng Western Blot

Phản ứng đa tác nhân Western blot cho phép phát hiện và định lượng nhiều protein trên cùng 1 blot đơn mà không cần tách rời và bắt tín hiệu lại. Với sapphire, người sử dụng có thể đọc cùng lúc 4 loại tín hiệu huỳnh quang và chụp ảnh đồng thời

Các dung dịch ly giải tế bào HeLa tăng vọt bằng transferrin được chụp trên Western Blot được bắt tín hiệu đồng thời với anti-tubulin (550 nm, màu xanh lá cây), anti ẞ-actin (700 nm, màu đỏ), anti-GAPDH (800 nm, màu xám) và chất chống -transferrin (490nm, màu xanh lam). Có thể thấy khả năng phát hiện cụ thể và nhạy cảm của cả bốn loại protein, không có bằng chứng về sự tự phát huỳnh quang nền hoặc chảy máu giữa các kênh

2.Chụp ảnh Gel có độ phân giải cao:

 Điện di (2D và SDS) cho phép hiển thị và định lượng những thay đổi rất nhỏ trong biểu hiện ADN và protein. Sapphire có dải động rất rộng, chụp ảnh có độ phân giải cao và khả năng tương thích với hầu hết các thuốc nhuộm, bao gồm EtBr, SYBR® Green, Coomassie™ Blue và Sypro® Ruby, cho phép phát hiện chính xác những thay đổi nhỏ trong các mẫu phức tạp.

            Lysate HeLa chưa được xử lý đã được dán nhãn Cy3. Lysate HeLa đã xử lý được dán nhãn Cy5. Các mẫu được phân tách đồng thời bằng cách sử dụng IEF ở thứ nguyên đầu tiên và SDS-PAGE ở thứ nguyên thứ hai.

         Transferrin tinh khiết được pha loãng trong huyết thanh theo tỷ lệ 1:1 từ 5000 pg thành 5 pg và được phân tách bằng SDS-PAGE trong gel Tris-Glycine 4-15%. Sau khi tách, gel được nhuộm bằng Coomassie Blue và được tạo ảnh bằng tia laser 658nm của Sapphire Biomolecular Imager.

3.Phản ứng ELISA trên tế bào:

   Các kháng thể sơ cấp đặc hiệu với mục tiêu và các kháng thể thứ cấp liên hợp với huỳnh quang cho phép phát hiện các protein trong các tế bào cố định. Với Sapphire, biểu hiện protein tương đối của một số protein mục tiêu có thể được đo nhanh chóng và chính xác trong nhiều mẫu bằng cách sử dụng thuốc nhuộm khác biệt về mặt phổ.

Các tế bào HeLa được pha loãng huyết thanh và cấy vào một đĩa 96 giếng, được nuôi cấy, cố định và được thấm, sau đó được thăm dò để tìm tubulin bằng AzureSpectra 550 (kênh 520, màu xanh lục), beta-actin với AzureSpectra 800 (kênh 780 nm, màu xanh lam) & RedDot™ 1 Vết màu hạt nhân dưới dạng điều khiển chuẩn hóa (kênh 780nm, màu đỏ).

4. Chụp ảnh trên tiêu bản:

Với khả năng chụp ảnh xuống tới 10 micron, Sapphire có thể chụp ảnh các đặc điểm rất nhỏ trên DNA huỳnh quang, protein và phiến mô.

Slide hiệu chỉnh máy quét Full Moon BioSystems được quét ở độ phân giải 10 μm bằng cách sử dụng các kênh 520 nm và 658 nm của Sapphire.

5.Chụp ảnh hóa phát quang (Chemiluminescent) :

Sự khuếch đại tín hiệu bằng hoạt động của enzyme có thể làm cho hình ảnh phát quang hóa học nhạy hơn so với các kỹ thuật phát hiện khác và tạo ra hình ảnh không có "nền" cho phép phát hiện nhanh các protein có mật độ thấp.

B. Ứng dụng hình ảnh hóa phát quang

1. Western Blot

Phim truyền thống có thể bão hòa nhanh chóng, khiến khó phân biệt đồng thời các dải mạnh và yếu. Sử dụng hình ảnh kỹ thuật số, Sapphire có dải động rộng cho phép định lượng cả mẫu có độ phong phú cao và thấp.

Hình ảnh đồng thời của các mẫu phát quang hóa học và đánh dấu trọng lượng phân tử màu. Hình ảnh được chụp nối tiếp, sau đó được phủ lên trong phần mềm chụp.

C.Chụp ảnh Phosphor :

Các mẫu được đánh dấu phóng xạ được tiếp xúc với màn hình phốt pho lưu trữ, sau đó ánh sáng được phát ra từ màn hình tương ứng với lượng phóng xạ trong mẫu khi kích thích bằng tia laser.

Tiêu chuẩn Carbon-14 tiếp xúc với Màn hình Phốt pho Lưu trữ trong ba giờ sau đó được chụp trên Máy ảnh Phân tử Sinh học Sapphire

 Mẫu: Tiêu chuẩn chụp ảnh tự động 14C. Hình ảnh: Phosphor. LOD: 0,036 μCi/g. DR: 5,4 bậc độ lớn. Độ tuyến tính: R2=0,99.

Sapphire có thể chụp hình nhiều hơn là blots và gel. Nó cho phép bạn tạo ra các hình ảnh có độ phân giải 10 μm của Western blots trong tế bào, slide microarray, mẫu mô, gel 2D, v.v.

                                                                            Đầu ong, hạt giống, mẫu mô và thân cây được chụp bằng Sapphire

Quá trình quét các tiêu bản microarray có độ phân giải lớn 10 μm cung cấp một phương pháp nhanh chóng để nắm bắt các kết quả thử nghiệm quy mô lớn.

Tài liệu kỹ thuật: 
Sapphire Biomolecular Imager brochure
Sapphire Biomolecular Imager applications overview
Detecting proteins in-situ with in-cell Western blotting application note
Increasing assay efficiency with four colour detection application note
Phosphor imaging with the Sapphire Biomolecular Imager application note

Video sản phẩm: